尊龙凯时推出的本产品是一种基于探针法荧光定量PCR原理开发的高灵敏度检测试剂盒，具有以下显著特点：

产品特点

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，即可快速开始实验。
2. 高灵敏度：经过优化的引物等组分，确保检测结果更加灵敏。
3. 附带阳性对照：该产品提供阳性对照样品，方便用户区分假阴性样本。
4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，有效防止与其他生物样本DNA的交叉反应。
5. 多功能性：本产品不仅适用于定性检测，也可用于广泛的定量检测，线性范围至少可达到五个数量级。
6. 大量检测：一次性配备50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 专用于科研：该产品仅供科研使用，不用于临床诊断。

操作步骤

一、样本制备

通过您选择的方法提取并纯化样品DNA，本试剂盒与大多数市场上核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

(在独立区域操作，以避免样品污染)
1. 标记6个离心管，分别为7、6、5、4、3、2。
2. 向每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL阳性对照，震荡1分钟得1×10E7拷贝/μL标准曲线样品，冰上保存。
4. 依次将稀释后的阳性对照加入6号管，随后5号管，直到得到6个稀释度的标准曲线样品，均置于冰上保存。如果不需要标准曲线，可以将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制

准备N+2个qPCR管，加入各成分（详细方法请参考说明书）。

四、添加模板

向qPCR管中各加入2μL模板，按照阴性对照、待测样品、阳性对照的顺序加入，然后离心30秒，以启动扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置在相应位置，进行扩增，具体扩增程序请参考说明书。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，以阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线。根据待测样品Ct值推算样品DNA浓度的log值。
2. 若未制作标准曲线，可依据以下标准进行结果判定：
- 阳性对照：Ct值<30，表现出典型S型曲线。
- 阴性对照：Ct值38或无Ct值，无明显增长期。
- 样本检测：Ct值<35表明婴儿利什曼虫检测阳性；Ct值38或无Ct值表明阴性；Ct值在35-38范围内需要复检。

运输与保存

产品需低温运输，-20℃保存，有效期为一年。阳性对照需单独存放，以避免污染其他试剂。