尊龙凯时提供优质的细胞复苏解决方案,帮助科研人员解决细胞复苏后状态不佳的问题。以下是可能导致细胞复苏后状态差的原因及其相应的调整方法。
1. 细胞冻存不当
如果细胞在冻存过程中处理不当,可能会影响复苏效果。为了解决这个问题,可以适当地调整细胞状态,增加血清的比例,并在后续传代中继续调整细胞培养条件。
2. 自行制备的冻存细胞无活性
当使用高代次的细胞进行冻存时,可能导致复苏后细胞活性低。建议使用传代次数少且处于对数期的细胞,并提高冻存时的细胞密度,推荐的密度为100~300万细胞/mL,以提高复苏存活率。
3. 细胞复苏方法不当
细胞复苏时应注重快速解冻,越快融化,细胞受损伤的程度越小。确保冷冻的细胞能够迅速解冻,同时在接种之前用预热的生长培养基慢慢稀释细胞。
4. 复苏培养基使用不当
在复苏过程中,务必确保培养基使用前已预热,并尽快移除含冷冻保护剂的培养基,以防止细胞活力下降。
5. 处理细胞时动作不够轻柔
冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影响。因此,在处理细胞时避免使用涡旋振荡或用力敲打培养瓶的方法(培养昆虫细胞时除外),同时也应避免高速离心细胞。
6. 细胞稀释过度
解冻后的细胞应以较高密度接种,以改善复苏效果。
7. 冻存液中保护剂未避光
如果冻存保护剂在储存过程中未避光,可能会转变为对细胞有毒的物质。因此,建议更换新的冻存保护剂,并重新冻存细胞。
尊龙凯时与上海雅吉生物合作,引进ATCC细胞,提供代次靠前、细胞活率高的细胞和完善的售后服务。如果您需要更多细胞系、原代细胞和培养试剂,欢迎随时咨询我们的服务。