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尊龙凯时间充质干细胞成脂诱导试剂盒

发布时间:2025-02-13   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时推出的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,货号:YJ-MSCYD-004,现售价12800元,提供规格为100ml和200ml的两种选择。

尊龙凯时间充质干细胞成脂诱导试剂盒

产品描述

本试剂盒经过我们团队的精心优化,旨在提升间充质干细胞向成脂细胞的诱导分化能力。请注意,本产品仅限于科研使用,严禁用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。

产品组成及保存

试剂名称 体积 (100mL/200mL) 保存条件及有效期
诱导分化添加剂I 5mL / 10mL -20℃,有效期1年
诱导分化添加剂II 1mL / 2mL -20℃,有效期1年
优质胎牛血清 10mL / 20mL -20℃,有效期1年
细胞基础培养基 85mL / 170mL 4℃,有效期1年
油红O染色液 5mL / 10mL 4℃避光,有效期1年

注意事项:为了确保产品的有效性,请避免反复冻融。配制好的诱导培养基应保存于2-8℃,并在2周内使用完毕,请根据实验需要进行合理配制。

使用说明

1. 完全培养基的配制

①在室温下融化各因子及血清,融化后进行瞬时离心,确保溶液集中于离心管底部。(注意:因子或血清中出现沉淀属正常,无需过滤,以免损失成分。)

②根据实验需要,在无菌操作台中配制诱导分化完全培养基,建议每次配制50mL,具体配制比例如下:

试剂成分 配制比例 50mL配制体系
诱导分化添加剂I 5% 25mL
诱导分化添加剂II 1% 50μL
优质胎牛血清 10% 5mL
细胞基础培养基 85% 425mL

2. 成脂诱导分化实验步骤

① 建议使用第3至第5代、纯度达到90%以上且状态良好的间充质干细胞,将其消化后离心收集,使用含10% FBS的完全培养基调整细胞密度并均匀铺于培养瓶或板中,放置于37℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。

② 当细胞汇合度达到80%至100%时,可以进行诱导分化。

③ 小心吸弃培养上清,沿孔壁缓慢加入事先配制好的诱导分化完全培养基,继续在37℃培养箱中孵育。(注意:在加入完全培养基之前应预热至37℃。)

④ 每2至3天更换一次新鲜的诱导分化完全培养基。如发现细胞培养上清颜色趋于澄清的黄色,说明细胞量较大,培养基消耗较快,应缩短更换周期。(注意:完全培养基加入前需预热。)

⑤ 细胞诱导3周后,即可进行油红O染色鉴定。

3. 油红染色分析

① 在细胞诱导分化结束后,小心吸弃培养上清,用1×PBS清洗1至2次,随后加入适量的细胞固定液,在室温下固定30分钟。(具体固定液参考表格中信息。)

② 配制油红O工作液:将油红O贮存液与蒸馏水按照3:2比例混合(例如:3mL油红O贮存液与2mL蒸馏水),混匀后用滤纸过滤,收集滤液得油红O工作液。(注意:成脂细胞内的油滴极易脱落,操作时请小心。)

③ 吸弃固定液,用1×PBS洗涤2次,沿孔壁缓慢加入适量油红O工作液,在室温下染色30分钟。(注意:操作时避免触及工作液底部的沉淀。)

④ 吸出染色液后,再用PBS洗涤以去除多余的染色,最后在显微镜下观察细胞染色效果,细胞内油滴呈红色。(注意:油红O工作液不可重复使用,不建议回收。)

通过使用尊龙凯时的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,您可以更高效地开展细胞分化研究,推动生物医学领域的创新与发展。