尊龙凯时推出的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,货号:YJ-MSCYD-004,现售价12800元,提供规格为100ml和200ml的两种选择。
产品描述
本试剂盒经过我们团队的精心优化,旨在提升间充质干细胞向成脂细胞的诱导分化能力。请注意,本产品仅限于科研使用,严禁用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。
产品组成及保存
试剂名称 | 体积 (100mL/200mL) | 保存条件及有效期 |
---|---|---|
诱导分化添加剂I | 5mL / 10mL | -20℃,有效期1年 |
诱导分化添加剂II | 1mL / 2mL | -20℃,有效期1年 |
优质胎牛血清 | 10mL / 20mL | -20℃,有效期1年 |
细胞基础培养基 | 85mL / 170mL | 4℃,有效期1年 |
油红O染色液 | 5mL / 10mL | 4℃避光,有效期1年 |
注意事项:为了确保产品的有效性,请避免反复冻融。配制好的诱导培养基应保存于2-8℃,并在2周内使用完毕,请根据实验需要进行合理配制。
使用说明
1. 完全培养基的配制
①在室温下融化各因子及血清,融化后进行瞬时离心,确保溶液集中于离心管底部。(注意:因子或血清中出现沉淀属正常,无需过滤,以免损失成分。)
②根据实验需要,在无菌操作台中配制诱导分化完全培养基,建议每次配制50mL,具体配制比例如下:
试剂成分 | 配制比例 | 50mL配制体系 |
---|---|---|
诱导分化添加剂I | 5% | 25mL |
诱导分化添加剂II | 1% | 50μL |
优质胎牛血清 | 10% | 5mL |
细胞基础培养基 | 85% | 425mL |
2. 成脂诱导分化实验步骤
① 建议使用第3至第5代、纯度达到90%以上且状态良好的间充质干细胞,将其消化后离心收集,使用含10% FBS的完全培养基调整细胞密度并均匀铺于培养瓶或板中,放置于37℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。
② 当细胞汇合度达到80%至100%时,可以进行诱导分化。
③ 小心吸弃培养上清,沿孔壁缓慢加入事先配制好的诱导分化完全培养基,继续在37℃培养箱中孵育。(注意:在加入完全培养基之前应预热至37℃。)
④ 每2至3天更换一次新鲜的诱导分化完全培养基。如发现细胞培养上清颜色趋于澄清的黄色,说明细胞量较大,培养基消耗较快,应缩短更换周期。(注意:完全培养基加入前需预热。)
⑤ 细胞诱导3周后,即可进行油红O染色鉴定。
3. 油红染色分析
① 在细胞诱导分化结束后,小心吸弃培养上清,用1×PBS清洗1至2次,随后加入适量的细胞固定液,在室温下固定30分钟。(具体固定液参考表格中信息。)
② 配制油红O工作液:将油红O贮存液与蒸馏水按照3:2比例混合(例如:3mL油红O贮存液与2mL蒸馏水),混匀后用滤纸过滤,收集滤液得油红O工作液。(注意:成脂细胞内的油滴极易脱落,操作时请小心。)
③ 吸弃固定液,用1×PBS洗涤2次,沿孔壁缓慢加入适量油红O工作液,在室温下染色30分钟。(注意:操作时避免触及工作液底部的沉淀。)
④ 吸出染色液后,再用PBS洗涤以去除多余的染色,最后在显微镜下观察细胞染色效果,细胞内油滴呈红色。(注意:油红O工作液不可重复使用,不建议回收。)
通过使用尊龙凯时的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,您可以更高效地开展细胞分化研究,推动生物医学领域的创新与发展。